枸杞是茄科植物（Lycium barbarum），它不仅是我国传统的珍贵中药材，还是被我国批准为药食同源的首批产品之一。但是，近几年枸杞根腐病的发病率高达53.2%以上，还呈逐步上升趋势，在青海省德令哈市、都兰县、诺木洪县、格尔木县和宁夏、内蒙古、新疆均有分布。 据已有研究文献报道，枸杞根腐病的致病菌约有尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、 腐皮镰刀菌（F. solani）、同色镰刀菌(F. concolor)等9种。其中又以尖孢镰刀菌致病力最强。而尖孢镰刀菌属于镰刀菌属土传真菌，该菌引起的病害很难防治。

“目前，防治枸杞根腐病害以培育种植抗病品种和使用化学药剂为主”。青海大学农林科学院、青海省农业有害生物综合治理重点实验室、农业农村部西宁作物有害生物科学观测实验站研究员郭青云介绍，”从植物根际土壤中分离出的生防菌在植物体表及土壤具有一定的定殖能力，相比真菌和放线菌，生防细菌种类和数量繁多，繁殖速度较快，还能产生特有的细菌素。”

生防细菌可以通过竞争作用，产生抑菌物质，诱导植物产生系统抗病性等方式有效抑制病原菌的危害。

(资料图片仅供参考)

于是，郭青云带领学生朱杰、程亮等，采用组织分离法，在分离枸杞根腐致病菌，对其进行形态学，分子生物学鉴定和柯赫氏法则验证后，再利用平板对峙法，以分离出的病原菌为靶标，筛选具有拮抗效果的菌株，对其进行鉴定分离鉴定枸杞根腐病病原菌后，并以此为靶标，筛选具有拮抗效果的生防细菌，明确其种类。

研究结果表明：从青海省海西蒙古族藏族自治州主要栽培枸杞林中分离鉴定出4种致病菌，分别为黄色镰刀菌Fusarium culmorum、三线镰刀菌 F. tricinctum、尖孢镰刀菌F. oxysporum、木贼镰刀菌F. equiseti；经筛选，有8株生防细菌对4种病原菌具有不同程度的拮抗效果，其中，抑菌效果最好的是QH-588菌株，其抑制率在36.09%-51.79%之间；经形态学和16S rDNA/Gyr B 基因分析鉴定，其中1株为萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeus，5株为枯草芽孢杆菌 B. subtilis，2株为短小芽孢杆菌B. pumilus。

“特别是经鉴定的三线镰刀菌是枸杞根腐病病原菌为国内首次报道，筛选出的生防细菌在室内对枸杞根腐病的4种病原均具有较好的拮抗效果，可为防治青海省枸杞根腐病提供候选菌株。” 郭青云在论文中强调。

以上研究成果发表于2023年《西北农业学报》6期上。

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A：接种黄色镰刀菌Inoculation with F. culmorum；B：接种三线镰刀菌Inoculation with F. tricinctum；C：接种木贼镰刀菌Inoculation with F. equiseti；D：接种尖孢镰刀菌Inoculation withF. oxysporum；E：接种清水Inoculated water

柯赫氏法则验证图。受访者供图

基于 16S和GyrB基因序列联合构建生防菌菌株的系统发育树。图片均由论文作者提供